正答2
解説
正解は2です。
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ〈AST〉の勧告法は、生成物を共役反応で検出する方法です。
どの物質が基質や補助試薬として加えられ、どれが反応で生じるのかを考えます。
この問題は試薬に含まれないものを選ぶので、○ が答え(試薬に含まれない物質)です。
【選択肢別解説】
1:× 還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド〈NADH〉は試薬に含まれます。
リンゴ酸脱水素酵素の反応で消費され、340nmの吸光度の減少として活性を測ります。
2:○ オキサロ酢酸は試薬には含まれません。
ASTの作用でL-アスパラギン酸から生成する物質で、これを共役反応で検出します。
試薬に初めから加えると測定が成り立ちません。
3:× L-アスパラギン酸は試薬に含まれます。
ASTがアミノ基を2-オキソグルタル酸に移す反応の基質です。
4:× リンゴ酸脱水素酵素〈MD〉は試薬に含まれます。
生成したオキサロ酢酸をNADHを使ってリンゴ酸に還元する共役酵素です。
5:× 2-オキソグルタル酸は試薬に含まれます。
アミノ基を受け取ってグルタミン酸になる基質です。
【ポイント】
AST測定はオキサロ酢酸をMDで、ALT測定はピルビン酸を乳酸脱水素酵素で検出します。
いずれもNADHの340nmでの減少速度から活性を求めます。