ヘキソキナーゼ・グルコース-6-リン酸脱水素酵素法を用いた血清グルコース測定における反応終結時の試薬対照における吸収スペクトル(別冊No.4)を別に示す。
主波長340 nmと副波長400 nmによる二波長法で測定した場合、患者血清のグルコース濃度〔mg/dL〕はどれか。
正答2
解説
正解は2です。
ヘキソキナーゼ・G6PD法では、グルコース量に比例して生じたNADPHを340 nmの吸光度で測ります。
二波長法では、主波長の吸光度から副波長の吸光度を引き、濁りや色などによる非特異的な吸収を補正します。
【図の読み取り】
別冊No.4では、患者血清(実線)の吸光度は340 nmで0.85、400 nmで0.25です。
200 mg/dLグルコース標準液(破線)の吸光度は340 nmで0.75、400 nmでほぼ0です。
患者血清は400 nmでも吸収が残っており、非特異的な吸収があることがわかります。
【計算】
患者血清の補正吸光度=0.85−0.25=0.60
標準液の補正吸光度=0.75−0=0.75
グルコース濃度=200×0.60÷0.75
グルコース濃度=160 mg/dL
【選択肢別解説】
1:× 120 mg/dLは計算結果と一致しません。
補正後の吸光度比0.60÷0.75に標準液濃度を掛けると160 mg/dLになります。
2:○ 160 mg/dLが正しい値です。
副波長で非特異的な吸収を差し引いた吸光度から求めています。
3:× 200 mg/dLは標準液の濃度です。
患者血清の補正後吸光度は標準液より小さいので、200 mg/dLより低くなります。
4:× 240 mg/dLは計算結果と一致しません。
患者の吸光度の方が標準液より大きいと誤解した値です。
5:× 280 mg/dLは計算結果と一致しません。
正しくは160 mg/dLです。
【ポイント】
340 nmの吸光度だけで計算すると、0.85÷0.75×200で約227 mg/dLとなり、高値に誤ります。
副波長は目的物質がほとんど吸収しない波長を選び、共存物質の影響を除きます。