第108回 薬剤師国家試験 問114
二次元電気泳動は、等電点電気泳動とSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）を組み合せたもので、ある生体試料中の多種多様なタンパク質をそれぞれ固有の等電点と分子量の違いを利用して分離する方法である。 図1と図2は、二次元電気泳動の概要と実験結果を示したものである。 図1 等電点電気泳動： pH 4～10の連続的なpH勾配を形成させた棒状のゲルを準備する。 このゲルを用いて電気泳動すると、試料中の各タンパク質はそれぞれの等電点の位置までゲル中を移動する。 （注： 実際にはこの段階ではゲルは染色しないためタンパク質は見えないが、図1の下段では電気泳動後にタンパク質が等電点で分離しているイメージを示した。） 図2 SDS-PAGE： 等電点電気泳動により試料中のタンパク質を分離した棒状ゲルを、SDS-PAGEの分離ゲルの上に移し、一次元目の等電点電気泳動と直角の方向に電気泳動する。 タンパク質は、その分子量に応じた位置まで移動する。 電気泳動の終了後、泳動用のガラス板から取り出したゲルを洗浄し、クマシーブリリアントブルーでタンパク質を染色したところ、50個のスポットを検出した。 図2中のスポットAは、等電点5.8、分子量56,000のタンパク質である。 このようなタンパク質分析法とその実験結果に関する記述のうち、誤っているのはどれか。 1つ選べ。 （図1：pH4～10の連続的pH勾配を形成させた棒状ゲル（等電点電気泳動用。左端がpH10、右端がpH4）の模式図と、一次元目の電気泳動後にタンパク質が等電点位置で分離しているイメージ図。図2：一次元目の棒状ゲルを上端に配置したSDS-PAGE用の板状ゲルの模式図（横軸は左がpH10で右へpH9・8・7・6・5・4と下がり、縦軸は上が−・下が＋の二次元目の電気泳動方向で下ほど分子量が小さい）、及び電気泳動・染色後に検出された約50個のスポットが散らばったゲルの図。スポットA（等電点5.8、分子量56,000）を通る水平の点線と垂直の点線が引かれており、スポットBはAと同じ水平の点線上（＝分子量はAと同じ）でAより左（塩基性側）に、スポットCはAと同じ垂直の点線上（＝等電点はAと同じ）でAより下（分子量が小さい方向）に位置し、それぞれ矢印で示されている。テキスト化困難なため図を参照。）
