第107回 薬剤師国家試験 問114
薬物Aに感受性のある培養細胞を用いて、その細胞内の代謝調節タンパク質Bについて調べることにした。 図1 （フローチャート：シャーレに薬物Aを添加し1時間培養する→培地を除去する／細胞を回収し破砕する→（細胞破砕液を）低速遠心する→上清／沈殿（核画分）に分離する→上清を高速遠心する→上清を除去／沈殿（膜画分）に分離する。） 操作の流れを図1に示す。 培地に薬物Aを添加して細胞を1時間培養した後、培地を除去してから細胞を回収した。 細胞を破砕し、低速度の遠心操作で核画分を分離回収した。 さらに高速度の遠心操作で、核を除いた細胞の膜画分を分離回収した。 また、対照として、培地に薬物Aを添加しなかった細胞についても同様の操作を行った。 ドデシル硫酸ナトリウムを用いたポリアクリルアミド電気泳動（SDS-PAGE）にて、核画分及び膜画分中のタンパク質を分離し、タンパク質Bに対するポリクローナル抗体を用いてウエスタンブロットを行った。 SDS-PAGEは、還元剤（2-メルカプトエタノール）を添加した条件と添加しない条件の2通りの方法で行ったところ、図2に示す結果を得た。 図2 （ウエスタンブロットの結果を示す図。「還元剤非添加」条件：レーン2（薬物A非添加・膜画分）に分子量約100 kDaのバンド、レーン3（薬物A添加・核画分）に約30 kDaのバンド、レーン4（薬物A添加・膜画分）に約70 kDaのバンドが検出された。レーン1（薬物A非添加・核画分）にはバンドなし。「還元剤添加」条件：レーン2に約75 kDaのバンドと約20 kDaのバンド、レーン3に約30 kDaのバンド、レーン4に約50 kDaのバンドと約20 kDaのバンドが検出された。レーン1にはバンドなし。テキスト化困難な部分（正確なバンド位置）は図を参照。） レーン1 薬物A非添加 核画分 レーン2 薬物A非添加 膜画分 レーン3 薬物A添加 核画分 レーン4 薬物A添加 膜画分 以上の実験とその結果から推測される記述のうち、正しいのはどれか。 2つ選べ。
正解を2つ選んでください。