以下は日本薬局方アセトアミノフェンの純度試験(液体クロマトグラフィー)の記述の一部である。
次の記述のうち、正しいのはどれか。
2つ選べ。
操作条件
検出器:A紫外吸光光度計(測定波長:225 nm)
カラム:内径約4 mm、長さ約15 cmのステンレス管に5 μmの液体クロマトグラフィー用Bオクタデシルシリル化シリカゲルを充塡する。
カラム温度:40℃付近の一定温度
移動相:CpH4.7の0.05 mol/Lリン酸二水素カリウム試液/メタノール混液(4:1)
流量:アセトアミノフェンの保持時間が約5分になるように調整する。
カラムの選定:本品及び4-アミノフェノール塩酸塩0.01 gずつをメタノール1 mLに溶かし、移動相を加えて50 mLとする。
この液1 mLをとり、移動相を加えて10 mLとする。
この液10 μLにつき、上記の条件で操作するとき、D の順に溶出し、そのE分離度が7以上のものを用いる。
正解を2つ選んでください。
正答3・5
解説
正解は3と5。
移動相Cのメタノール含量を増やすと、逆相分配系(オクタデシルシリル化シリカゲル=C18)では移動相の溶出力が高まりアセトアミノフェンの保持時間は短くなる。
分離度が1.5以上であればベースライン分離とみなされ、記述の分離度7以上の条件はそれを大きく上回るため2つのピークは完全分離しており選択肢5は正しい。
紫外吸光光度計の光源には通常、重水素放電管が用いられ、キセノンランプではないため選択肢1は誤り。
ODSシリカゲルはオクタデシル基(C18)を化学結合した逆相系の固定相であり、順相系ではないため選択肢2は誤り。
カラム選定条件では極性の高い4-アミノフェノールが先に、疎水性の高いアセトアミノフェンが後に溶出するため、Dの順序は記述と逆であり選択肢4は誤り。